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更新時(shí)間:2025-01-23
抗壞血酸過(guò)氧化物酶測(cè)試盒(APX)
(Ascorbate Peroxidase,分光光度法 50 管/48 樣)
一、測(cè)定意義:
抗壞血酸過(guò)氧化物酶(Aseorbate Peroxidase,APX)是以
抗壞血酸為電子供體且專(zhuān)一性強(qiáng)的過(guò)氧化物酶,主要存在于植
物葉綠體和胞漿中,是葉綠體中清除H2O2關(guān)鍵酶,也是抗壞血
酸代謝的重要抗氧化酶。H2O2是植物葉綠體中光合電子傳遞鏈
和某些酶反應(yīng)的天然產(chǎn)物,是具有毒害作用的活性氧。APX具
有多種同功酶,主要分為兩大類(lèi)型:一種為位于葉綠體中并分
解葉綠體中的H2O2的葉綠體型同工酶;另一種為位于葉綠體之
外的其它細(xì)胞組分(分別定位于胞質(zhì)、線粒體、過(guò)氧化物和乙
醛酸體,以及過(guò)氧化體和類(lèi)囊體膜上)的細(xì)胞質(zhì)型同工酶。
二、測(cè)定原理:
抗壞血酸過(guò)氧化物酶(APX)催化抗壞血酸(ASA)與過(guò)
氧化氫(H2O2)反應(yīng),使ASA氧化成單脫氫抗壞血酸(MDASA)。
隨著AsA被氧化,溶液中290nm波長(zhǎng)下的吸光度值(A290)下降,
根據(jù)單位時(shí)間內(nèi)A290減少值,計(jì)算抗壞血酸過(guò)氧化物酶(APX)
活性。ASA氧化量按消光系數(shù)2.8(mol/mL)/cm計(jì)算。
三、自備儀器用品:
低溫離心機(jī)、紫外分光光度、1cm光徑石英比色皿、移液槍、
研缽、冰和蒸餾水
五、【儲(chǔ)存條件及有效期】
試劑于 2~8℃保存可穩(wěn)定 3 個(gè)月。
六、操作步驟
1、粗酶液提?。?/span>
按組織質(zhì)量(g):緩沖液體積(mL)=1:9的比例加入
試劑一(如0.1g組織加入0.9mLR1緩沖液),冰水浴勻漿,
10000rpm/min,離心10min,取上清待測(cè)。
抗壞血酸過(guò)氧化物酶測(cè)試盒(APX)